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酶標板實(shí)驗優(yōu)化:加樣、洗滌、讀板全流程技巧
以下是天津本生對酶標板實(shí)驗全流程優(yōu)化的關(guān)鍵技巧,涵蓋加樣、洗滌和讀板三大核心環(huán)節:
一、加樣優(yōu)化技巧
精準加樣控制?
使用多道移液器(誤差<2%),單次加樣時(shí)間控制在10分鐘內,避免預孵育時(shí)間差異影響重復性
高濃度樣本需預稀釋(如1:20 PBS稀釋),溶血樣本應棄用
防蒸發(fā)處理?
孵育時(shí)反應板需加蓋密封膜,并置于鋪有濕布的密閉盒內保持濕度
液體樣本4℃保存≤1周,-80℃長(cháng)期保存需密封防凍干
二、洗滌關(guān)鍵參數
操作要點(diǎn) 優(yōu)化方案 注意事項
洗滌液配制 Tween-20濃度0.05%-0.1%,含0.5M NaCl 避免使用含疊氮鈉的緩沖液(HRP系統)
洗滌次數 常規3-5次,高背景樣本增至8次 競爭法需控制單次洗滌≤2分鐘
拍干方式 倒置拍板力度均勻,使用無(wú)屑濾紙 垂直猛拍易導致包被物脫落
三、讀板質(zhì)量控制
顯色控制?
底物加入后每10分鐘觀(guān)察顯色,強陽(yáng)性孔需提前終止
雙波長(cháng)檢測(主450nm/參比630nm)可減少孔間干擾
儀器校準?
讀板前預熱酶標儀,設置溫控參數(如37℃±0.5℃)
邊緣孔數據棄用,僅分析中間60孔保證一致性
四、特殊樣本處理
高脂血樣本?:12000rpm離心10分鐘去除脂蛋白
組織勻漿?:添加RIPA裂解液后-80℃保存,避免反復凍融
流程銜接提示?:
洗滌后需立即進(jìn)行下一步操作,酶標板干燥會(huì )導致復合物失活
自動(dòng)化洗板機需定期校準吸液高度(距孔底0.5-1mm)
注:以上資料僅供參考,如需完整說(shuō)明,建議聯(lián)系供應商獲取隨貨文件。
天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng),是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng )美好的未來(lái)。
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