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以下是豬黃體生成素(LH)ELISA試劑盒的實(shí)驗使用說(shuō)明綜合整理:
BS-4691 豬黃體生成素(LH)ELISA試劑盒
一、試劑盒組成
預包被板條?:96孔或48孔微孔板(可拆卸)
標準品?:通常包含6個(gè)濃度梯度(如0-160 ng/mL)
檢測溶液?:包括HRP標記抗體、TMB底物、終止液等
洗滌液?:30倍濃縮液,需蒸餾水稀釋
二、樣本處理
血清/血漿?:采集后室溫靜置1-2小時(shí),3000rpm離心15分鐘,避免溶血或反復凍融
組織勻漿?:用預冷PBS(含蛋白酶抑制劑)研磨,5000×g離心取上清
保存條件?:短期存于2-8℃,長(cháng)期需-20℃以下保存
三、實(shí)驗步驟
平衡試劑?:所有試劑室溫平衡30分鐘后再使用
加樣?:
標準品孔:50μL梯度濃度標準品
樣本孔:10μL樣本+40μL稀釋液
孵育?:37℃避光溫育60分鐘,需加蓋封板膜防止蒸發(fā)
洗滌?:手工洗板需重復5次,拍干殘留液體
顯色?:每孔加TMB底物50μL,37℃避光顯色15分鐘
終止與檢測?:加終止液后15分鐘內測450nm OD值
四、注意事項
操作規范?:避免底物接觸金屬器具,顯色后及時(shí)終止
質(zhì)量控制?:建議標準品和樣本做復孔,減少誤差
失效提示?:若標準曲線(xiàn)R2<0.99需重試
五、結果計算
通過(guò)標準曲線(xiàn)擬合方程計算樣本濃度,線(xiàn)性范圍為9.375-600 mIU/mL。
如需更詳細說(shuō)明,可參考具體試劑盒附帶的說(shuō)明書(shū)。
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