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人胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
發(fā)布時(shí)間:2024/12/19瀏覽:273次
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人胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū) 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng),是我們的發(fā)展目標,本生,您信任的合作伙伴!本生試劑盒

  人胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)通常包括試劑盒的用途、實(shí)驗原理、試劑盒組成、樣本處理及要求、操作步驟、注意事項以及試劑盒性能等內容。以下是一份基于多個(gè)來(lái)源整合的IGF-1 ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)概要:

  一、試劑盒用途

  本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF-1)的含量。

  二、實(shí)驗原理

  試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF-1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF-1)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

  三、試劑盒組成

  試劑盒通常包含以下組件(具體數量可能因不同廠(chǎng)家或批次而異):

  酶標包被板

  標準品

  標準品稀釋液

  酶標試劑

  樣品稀釋液

  顯色劑A液和B液

  終止液

  濃縮洗滌液

  封板膜

  密封袋

  說(shuō)明書(shū)

  四、樣本處理及要求

  ?血清?:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

  ?血漿?:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

  ?組織勻漿?:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會(huì )影響測量結果),稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5-10分鐘,取上清檢測。

  ?細胞培養物上清或其它生物標本?:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

  五、操作步驟

  ?標準品的稀釋與加樣?:在酶標包被板上設標準品孔,加入不同濃度的標準品。

  ?加樣?:分別設空白孔、待測樣品孔,加入待測樣品。

  ?溫育?:用封板膜封板后置37℃溫育一定時(shí)間。

  ?洗滌?:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置后棄去,重復多次,拍干。

  ?加酶?:每孔加入酶標試劑(空白孔除外)。

  ?溫育?:同前。

  ?洗滌?:同前。

  ?顯色?:每孔加入顯色劑A和B,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色一定時(shí)間。

  ?終止?:每孔加終止液,終止反應。

  ?測定?:以空白空調零,450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD值)。

  六、注意事項

  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。

  濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結果。

  各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。

  請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn),最好做復孔。

  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  底物請避光保存。

  嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。

  所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

  七、試劑盒性能

  ?檢測范圍?:根據不同廠(chǎng)家和批次,檢測范圍可能有所不同,如5ng/mL~160ng/mL。

  ?靈敏度?:低檢測濃度小于一定值,如1.0ng/mL。

  ?特異性?:不與其它可溶性結構類(lèi)似物交叉反應。

  ?重復性?:板內變異系數和板間變異系數均小于一定值,如板內變異系數小于10%,板間變異系數小于15%。

  請注意,以上內容僅為一般性說(shuō)明,具體使用時(shí)應嚴格遵循所購試劑盒附帶的使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

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