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雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒實(shí)驗使用說(shuō)明書(shū) 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng)，是我們的發(fā)展目標，本生，您信任的合作伙伴！本生試劑盒
雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒試驗原理：
英文名稱(chēng)：Chicken Interleukin 9,IL-9 ELISA試劑盒
本試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(ELISA).已知待測物質(zhì)濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進(jìn)行檢測。先將待測物質(zhì)和生物素標記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中指標的濃度呈比例關(guān)系。
試劑盒內容及其配制：
試劑盒成份96孔配置48孔配置
96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊(48T)
塑料膜板蓋1塊半塊
標準品1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)
空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)
標準品稀釋緩沖液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)
生物素標記抗體1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)
親和鏈酶素-HRP1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)
洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)
底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)
底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)
終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)
自備材料：
1. 蒸餾水。
2. 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法：
1、 血清-----操作過(guò)程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
操作注意事項：
l 試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄，不可保存。
l 實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
l 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
l 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
l 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
l 底物A應揮發(fā)，避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感，避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
l 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
安全性：
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒試劑盒性能：
1. 靈敏度：最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線(xiàn)性。樣品線(xiàn)性回歸與預期濃度相關(guān)系數R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。
操作步驟：
1. 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個(gè)標準品和空白孔建議做復孔。每個(gè)樣品根據自己的數量來(lái)定，能使用復孔的盡量做復孔。
3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
4. 甩去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。
8. 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
9. 在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。
雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒結 果 判 斷 與分析：
1、儀器值：于波長(cháng)450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y)，相應的指標標準品濃度為橫坐標(X)，做得相應的曲線(xiàn)，樣品的含量可根據其OD值由標準曲線(xiàn)換算出相應的濃度, 再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線(xiàn)的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實(shí)際濃度。
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